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肠道微生物刺激组织蛋白酶K分泌介导TLR4依赖的M2巨噬细胞极化并促进结直肠癌转移
研究背景和目的:结直肠癌(CRC)是全球发病率第三的恶性肿瘤,肿瘤微环境在CRC的发生进展尤其是远处转移过程中发挥重要作用。作为微环境的重要组成,肠道微生物群的失衡在CRC的在启动及进展过程中的具体机制仍然未知。
本项研究旨在探讨肠道固有菌群失衡与结直肠癌发生侵袭转移的关联,寻求肠道菌群与肿瘤以及肿瘤微环境间潜在作用机制。研究方法:1、四联抗生素处理构建小鼠菌群失衡模型,RT-PCR及mRNA芯片分析筛选菌群失衡相关的肿瘤转移关键蛋白;2、Western Blot和免疫组织化学染色检测人结直肠癌组织中该蛋白的表达,分析其表达与临床参数的关系;3、应用Transwell、划痕和细胞3D培养、CCK8、平板克隆、裸鼠皮下成瘤和尾静脉肺转移模型观察蛋白内源性改变对CRC细胞体内外增殖和转移能力的影响;4、应用巨噬细胞样细胞和小鼠腹腔原代巨噬细胞,与肿瘤细胞建立共培养体系;5、流式细胞术和免疫荧光检测加入外源性重组蛋白后巨噬细胞形态及分型改变,Western Blot及免疫荧光检测巨噬细胞信号通路的变化;6、免 ...

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关键词：结直肠癌 直肠癌 蛋白酶 微生物 Western