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尘螨变应原特异的重组人单抗IgG Fab片段的制备及生物学活性研究
变态反应性疾病特别是哮喘是危害严重的全球性公共卫生问题,在大多数国家,哮喘的发病率及死亡率呈持续上升趋势。尘螨变应原是引起变态反应性疾病的重要病因之一,特别是引起儿童变应性哮喘的重要危险因子。
变应性疾病的病因复杂,除了复合多基因式遗传外,出生前后与环境变应原的接触也至关重要。鉴于此,WHO提出儿童变应性疾病的三级预防理论并呼吁一级预防应成为今后研究的重点。
多项研究表明孕期母体高水平的变应原特异IgG抗体对胎儿今后发生变应性疾病具有抑制作用。因此,本课题拟制备尘螨变应原特异的人源抗体IgG Fab片段用于螨性变应性疾病的防治研究。
首先分离接受尘螨注射液脱敏治疗并证实具有高水平抗尘螨IgG的变应性哮喘患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,构建非依赖性克隆滴度为8×108的抗尘螨变应原的IgG抗体库；同时分离近两个月内未曾患感冒等感染性疾病的300名健康志愿者的外周血淋巴细胞,同法构建非依赖性克隆滴度为9×108的人IgG抗体库。以实验室培养的粉尘螨制备粉尘螨螨体浸出液、代谢培养基浸出液并利用基因工程手段制备重组2类变应 ...
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