第八节 基因工程药物的分离纯化技术
(一)工程细菌所表达出蛋白质的特点(二)分离纯化技术的重要性(三)建立分离纯化工艺的根据(四)分离纯化技术的基本要求和工艺优化(五)分离纯化的基本步骤(六)分离纯化的基本方法
(一)工程细菌所表达出蛋白质的特点
1、目的产物在初始物料中含量很低。2、初始产物的组成十分复杂。除了目的蛋白质之外,还含有残余细胞、代谢产物、残余培养基、各种无机盐。3、目的蛋白质的稳定性很差,容易失活、变性,对于温度、PH、金属离子、有机溶剂十分敏感和脆弱。4、目的蛋白质的种类繁多,存在着大小不同的片段。5、纯度不高、常常含有杂菌、热原等等物质。
(二)分离纯化技术的重要性
为了获得高纯度、可供药用有生物活性蛋白质,必须对基因工程药物进行一定的分离和纯化。1、分离----以大肠杆菌为宿主的基因工程药物多为胞内产物,分离提取这类产物时,需要经过细胞收集、细胞破碎、细胞碎片分离的过程。2、纯化----经过破碎和分离之后,目的产物仍然存在着大量的杂质,杂蛋白质、类似蛋白质的异构体,为了获得合格的目的产物,必须进行纯化操作。3、精制----非蛋白质类纯质在经过纯化操作之后,仍然无法 ...


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