干扰Ca-(2+)对TNF-α诱导鼠肺成纤维细胞增殖的影响

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干扰Ca~（2+）对TNF-α诱导鼠肺成纤维细胞增殖的影响
目的：探讨Ca2+拮抗剂尼莫地平(Nim)对肿瘤坏死因子-alpha(TNF-a)诱导鼠肺成纤维细胞增殖的影响,为尘肺发病机制的研究提供科学依据。方法：对SD大鼠乳鼠肺成纤维细胞进行原代培养和传代培养,传至4-5代后,用不同浓度TNF-α刺激成纤维细胞,培养一定时间,用Western blot技术检测成纤维细胞Gq蛋白的表达；用流式细胞技术检测成纤维细胞内Ca2+的含量。
用TNF-α联合不同浓度的钙拮抗剂尼莫地平(Nim)刺激成纤维细胞,培养一定时间,用氯氨T法检测成纤维细胞羟脯氨酸的含量；用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定成纤维细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)的含量；用荧光免疫组化技术检测成纤维细胞内蛋白激酶A(PKA)的表达。结果：1. Western blot结果显示：当不同浓度的TNF-α作用于鼠肺成纤维细胞时,在4h时间点,随着TNF-α剂量的增加,各实验组Gq蛋白的表达量也明显升高,且各组间差异均有显著性(P<0.05)。
在24h时间点,各实验组Gq蛋白的表达量均较对照组显著增高(P<0.05)。2 ...

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