楼主: ruhemiadui
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[学习资料] 大豆子叶节遗传转化流程 [推广有奖]

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ruhemiadui 发表于 2025-4-3 08:10:46 |AI写论文

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大豆子叶节再生体系遗传转化流程
1材料1.1大豆品种:
william82
沈农9号华春3号华春6号天隆1号Jack
等1.2菌种和质粒:质粒由实验室构建保存,多为
Bar基因筛选,常用根癌农杆菌为
EHA101, EHA105
等,甘油管
分装-80℃保存1.3培养基:培养根癌农杆菌用
YEB培养基,大豆组培用培养基为
MS培养基的无机盐加上
B5培养基的维生素
(具体成分不详)
2方法2.1农杆菌的培养及制备
:取50~100ul
甘油管保存的菌液接种于
5ml含抗生素的
YEP液体培养基中,
28℃摇床培养过夜(活化菌体)。第二天取该菌液
30~50ul
均匀涂布于添加了抗生素的
YEP固体培养基上,
28℃培养2天。2天后用小勺刮取
YEP固体培养基上的菌体重悬于侵染液中(侵染液:共培养液体培养基
CCM+
乙酰丁香酮
+表面活性剂
silwetl-77
,乙酰丁香酮使用浓度为0.0392
g/L,使用DMSO
溶解,现用现配
;表面活性剂:侵染液
=1:1000
),OD600调整为0.5~0.8
。2.2外植体制备
:选取种皮光滑无病斑、无裂纹、无霉菌的成熟大豆种子,将成熟 ...
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关键词:William 表面活性剂 will Jack 培养基

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