楼主: ruhemiadui
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[学习资料] TPS法提取植物DNA [推广有奖]

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ruhemiadui 发表于 2025-4-16 07:39:21 |AI写论文

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TPS法提取植物
DNA取少量叶片置
2ml管子中,加入钢珠;
粉碎机粉碎
加入400-500ul TPS
,75℃水浴30mins
;;12000rpm
离心10mins
;取上清加等体积异丙醇
,放置-20℃5h以上;12000rpm
离心5mins
,去上清;
加入200ul 75%
酒精,静置
10mins
,离心2mins
,去酒精,干燥;
加50ul ddH
2O,混合均匀,离心。
TPS配方100ml
1M (PH8.0) Tris-HCl 10ml
0.5M EDTA (PH8.0) 2ml
KCl 7.45g
ddH2O至100ml
优点:该方法适合
大量粗提取
DNA,如果现提现用可以直接吸取上清液并稀释
5或10倍直接使用(适用于
PCR鉴定转基因以及大群体图位克隆)。经过异丙醇沉淀之后
DNA有较好的质量,
4℃能够储存超过一星期,该方法相对正常的
SDS或是CTAB
法能够省去
24:1
的毒害而且经过测试实际效果不输
CTAB
法。如果足够懒惰还可以
一小片叶片放
96孔板直接加
TPS放PCR仪95℃30min
,然后稀释使用。
缺点:DNA质量低,不宜扩 ...
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