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雷达卡
感受态细胞制备
1.挑取一单克隆与
5 ml LB
培养基中，
37℃，200rpm
过夜。2.取2 ml
菌液于新鲜的
200 ml LB
中，置于
37℃摇床至
OD约为0.5.
3.收集菌于
4个50 ml
离心管中，冰浴
1h.4.4℃离心5—15min
，3500 rpm
，去上清。（以后所有枪头、离心管都要冷浴）
5.加20 ml
冷的Buffer 1
于每个50 ml
离心管中，轻轻摇匀。
6.冰浴15 min
。7.轻弹后3500 rpm 5
—15 min
，4℃，去上清。
8.重悬总共
8 ml
的冷Buffer 2
（每50 ml
管中加2 ml
），冷浴
30—60 min
。9.在1.5 ml
离心管中分装
50μl,液氮速冻后存于
-80℃。溶液配制：
Buffer 1 500 ml 100 ml
RbCl(Rubidium chloride) 6.0g 1.2g
MnCl
4H2O5.0 1
醋酸钾溶液（高压过）
15 ml
（1mol/L pH=7.5
）3Cacl2
2H2O 0.75g 0.15g
甘油75 ml 15 ml
用ddH2O混匀，调 ...
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