电泳检测技术是指利用带电颗粒在电场中能向异性电极泳动这一现象来分离、纯化或分析
检测供试品的一种生物化学技术。
原理:许多生物分子都带有电荷,在电场作用下可发生移动,由于混合物中各
组分所带电荷性质、数量以及相对分子质量各不相同,使在同一电场作用下,各组分的泳
动方向和速率也各有差异,所以在一定时间内,它们移动距离不同,从而可达到分离鉴定
的目的。
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,包括电荷效应和分子筛效应。
琼脂糖是由天然的琼脂加工制得,是一种直链杂聚多糖,溶于热水,形成溶胶,
冷却后成为孔径范围从 50nm到大于 200nm的大网孔径凝胶。由于孔径较大,对一般蛋白
质不起分子筛作用,该电泳技术是目前分离、分析 DNA片段的标准方法。
DNA琼脂糖凝胶电泳的原理
DNA分子是两性电解质,在高于其等电点的溶液( pH8.0~pH8.3 DNA分子本身的大小
和构型、凝胶浓度决定了 DNA分子的迁移速度。)中,碱基几乎不解离,磷酸基团全部解
离, DNA分子带负电荷,在电场中向正极移动。
DNA分子大小对迁移速率的影响:相对分子质量大,迁移慢;相对分子 ...


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