细胞凋亡诱导与检测

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Hela
细胞凋亡诱导与检测
生92 盛心磊 2009012337
周四班 同组同学：王璇
实验目的：
学习掌握细胞凋亡的原理以及诱导凋亡的方法。
了解DAPI
染色的原理、
方法并用它检验细胞凋亡
。实验器材
显微镜、
移液器、离心机、显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、显微摄影技术仪器
、锡纸。
实验试剂PBS溶液以成品干粉加超纯水配制；过滤后
121C
灭菌20 min
，4C保存H22溶液消化液：
0.25%
胰蛋白酶－
0.02%EDTA
溶液DAPI染液
实验步骤：
细胞凋亡诱导
将对数增长期的细胞用
0.25%
胰酶消化，调整细胞数为
4×10
5/L，胞悬浮于
100μL DMEM
培养基。加H2O2处理，至终浓度为
0.8mmol/L
。（H2O2母液浓度
8.8mol/L
）24小时后收集细胞进行染色和形态学观察。
细胞凋亡检测
收集细胞
(200uL
胰酶37℃消化后，再加入
1mL培养基)至1.5mL EP
管，1000
rpm离心5min
。吸出上清，于沉淀中加入
100uL
甲醇溶液
，室温固定
10min
。1000
rpm离心5min
。弃上清，加
10 ...

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关键词：摄影技术 实验步骤 实验目的 Min 培养基