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3种5’RACE技术的比较与优化
【摘要】 目的 研究环化法、末端脱氧核糖核酸转移酶法和SMART反转录酶法3种常用5‘RACE的技术的特点，并对它们进行了优化。方法 以播娘蒿RNA为模板，先按文献标准方法进行5‘RACE，然后通过增加反应时间，提高部分反应物浓度等方法进行优化。结果 未优化前环化法和TdT酶法条带几乎不可见，SMART反转录酶法隐约可见条带，但不清晰。优化条件后，环化法出现弥散条带，TdT酶法胜之，但条带依旧弥散，而SMART反转录酶法最佳，获得清晰特异性条带。结论 SMART 5‘RACE效果最好，其次为TdT酶法，环化法效果有待改进，同时通过优化条件可以明显增加产物的特异性，为实验研究中5‘RACE方法的选择提供了依据。
【关键词】 5‘RACE；比较；优化
Abstract：Objective To study the characters of Cycling 5‘RACE,TdT 5‘RACE and SMART 5‘RACE methods and optimize Standard 5‘RACE ways were done at first w ...
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