发布时间：2015-03-30 来源：人大经济论坛

食品科学与工程论文范文 目录 第一部分 前言2 1尿酸酶的研究简史[3，4]3 2核酸疫苗4 2.1质粒载体的生物学特征5 2.2 pET28a和pcDNA3.1-Uc的结构特征5 3酶类制剂7 3.1酶纯化方法[10]8 3.2酶含量的测定9 3.3尿酸酶活性的测定方法[12]9 3.3.1终止反应法（Stopped Method）9 3.3.2连续反应法（Continuous Method）10 4高尿酸血症动物模型的研究[14]10 4.1建立高尿酸酶血症动物模型的基本原理11 4.2动物的选择12 4.3 鸡痛风病模型的研制13 5 实验目的和意义15 第二部分 尿酸酶的核酸（pcDNA3.1-UC质粒）制剂在鸡体内的表达研究15 1材料与方法15 1.1 材料15 1.1.1 菌种和质粒15 1.1.2试剂和溶液配置15 1.1.3 仪器19 1.2实验方法20 1.2.1菌体的活化20 1.2.2质粒pcDNA3.1-UC大量制备20 1.2.3质粒pcDNA3.1-UC的琼脂糖凝胶电泳21 1.2.4经RNA酶消化后的pcDNA3.1-UC质粒的琼脂糖凝胶电泳21 1.2.5离子交换层析纯化pcDNA3.1-UC质粒21 1.2.6 PCR鉴定纯化质粒为pcDNA3.1-UC23 1.2.7 pcDNA3.1-UC质粒在鸡体内的表达的检测24 2结果与分析27 2.1 电泳检测提取的pcDNA3.1-UC质粒27 2.2经RNA酶消化后的pcDNA3.1-UC质粒的琼脂糖凝胶电泳检测27 2.3 DEAE离子交换层析曲线28 2.4 纯化质粒为pcDNA3.1-UC PCR鉴定29 2.5 pcDNA3.1-UC质粒在鸡体内的表达分析29 2.5.1质粒DNA溶液浓度的测定实验结果29 2.5.2 鸡血清尿酸含量测定试验结果:30 3讨论34 第三部分 尿酸酶制剂在鸡体内的应用研究34 1材料与方法34 1.1材料34 1.1.1菌种34 1.1.2 试剂及其配置34 1.1.3 仪器37 1.2 实验方法38 1.2.1 酶活性的检测38 1.2.2菌体的培养及诱导表达39 1.2.3表达产物的提取39 1.2.4硫酸铵分段盐析40 1.2.5 酶蛋白浓缩40 1.2.6分子筛层析分离BL21/ pET28a-UC表达产物40 1.2.7 鸡血清尿酸含量测定43 1.2.8 ELISA实验检测鸡尿酸酶抗体44 2 结果与分析46 2.1分子筛（sephadex-200）纯化BL21/ pET28a-UC表达产物的结果46 2.2尿酸酶溶液中酶活性测定的实验结果46 2.3 酶蛋白的DEAE离子交换曲线及结果47 2.4尿酸酶溶液的浓度测定实验结果48 2.5已纯化的尿酸酶SDS PAGE结果48 2.6 鸡尿酸含量测定试验结果49 2.7 ELISA实验结果52 3讨论53 第四部分 创新点与总结53 参考文献54 致谢58