实验7-改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素20151116课件

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实验七 改良J-G法测定血清总胆红素
    和结合胆红素
一. 目的要求
掌握本法测定血清胆红素的基本原理。熟悉本法测定血清胆红素的基本操作步骤及参考值。了解临床测定血清胆红素的主要方法及意义。
二．实验原理
血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素；在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂，醋酸钠缓冲液可维持反应的pH值同时兼有加速作用。(叠氮钠破坏剩余重氮试剂，终止结合胆红素测定管的偶氮反应。) 最后加入碱性酒石酸钠，在碱性条件下，紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素，使最大吸光度由530nm转移到598nm，此时，非胆红素的黄色色素及其他红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计，使测定的灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。

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关键词：胆红素 苯甲酸钠 操作步骤 基本原理 咖啡因