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臭灵丹酸抗流感病毒及抗炎作用机制研究
目的:将来自于云南传统药物臭灵丹具有抗流感病毒的活性成分C8(倍半萜类混合物)作进一步的组分分析,并分离出具有抗病毒成分的化学单体。研究化学单体对于不同亚型流感病毒的抑制作用,并进一步研究其对于流感病毒复制周期不同环节的阻断作用强度,同时明确单体对于流感病毒感染引起的相关宿主信号通路和细胞因子、趋化因子的转录水平和蛋白水平的变化,从而阐明化学单体抗流感病毒及病毒引起相关炎症的作用机制,为臭灵丹的临床用药提供基础研究参考。
方法:利用超高效液相色谱对臭灵丹的C8(倍半萜类混合物)成分进行组分分析和定量,并通过硅胶柱层析进一步分离化学单体。对于分离化学单体,以细胞病变法进行不同呼吸道病毒和不同亚型流感病毒的体外药效筛选,并针对筛选有效的单体开展预防、治疗和直接作用的三个药效作用模式筛选,并利用血凝抑制试验、病毒聚合酶活性抑制试验、NF-КB激活试验、免疫荧光试验和神经氨酸酶活性抑制试验等5个试验鉴别单体抗病毒药效作用于流感病毒的生活复制周期的具体环节,最后利用荧光定量PCR技术寻找单体对于流感感染引起的主要细胞因子和趋化因子mRNA表达的抑制作用,并通 ...
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