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仿刺参类硫氧还蛋白基因克隆、表达分析和功能验证
仿刺参具有很高的营养价值和经济价值,是我国沿海最重要的养殖品种之一。然而,近年来,各个年龄段的仿刺参病害的大规模爆发对其养殖产业造成了严重威胁,深入研究刺参的抗病机制和有效防治途径已经成为当前仿刺参养殖基础研究中的热点。
本文以仿刺参[Apostichopus japonicus(Slenka)]为研究对象,通过RACE克隆技术获得了仿刺参类硫氧还蛋白(AjTRX)基因的cDNA序列,运用荧光定量PCR技术研究了其在不同组织和灿烂弧菌(Vibrio splendidus)刺激后的表达情况;此外,参照基因工程技术表达和纯化出了AjTRX基因的重组蛋白,并对其的活性进行了验证;最后,通过RNA干扰技术研究了AjTRX基因与活性氧(ROS)生成量之间的关系。主要研究结果如下:1.本实验结合转录组文库的筛查结果和RACE克隆技术,首次得到了仿刺参AjTRX基因的cDNA全长。

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关键词：DNA序列 race Opus post 工程技术