第二篇 细胞的遗传物质
第三章
基因表达的分析技术
生物性状的表现均是通过基因表达调控实现的。对基因结构与基因表达调控进行研究,是揭示生命本质的必经之路。在基因组研究的过程中,逐步建立起一系列行之有效的技术。针对不同的研究内容,可建立不同的研究路线。
第一节PCR技术
聚合酶链
反响〔polymerase chain reaction,PCR
〕技术是一种体外核酸扩增技术,具有特异、敏感、产率高、快速、简便等突出优点。。PCR技术日斟完善,成为分子生物学和分子遗传学研究的最重要的技术。应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在很短的时间内体外扩增数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察,并作进一步的分析。
一、实验原理
PCR是根据DNA变性复性的原理,通过特异性引物,完成特异片段扩增。第一,按照欲检测的
DNA的5'和3'端的碱基顺序各合成一段长约
18~24个碱基的寡核苷酸序列作为引物
〔primer
〕。引物设计需要根据以下原
那么:①引物的长度保持在
18~24bp
之间,引物过短将影响产物的特异性,而引物过长将影响产物的合成效率;②
GC含量应保持在
45~60%之 ...


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