PD-1通路在BVDV抑制牛外周血T淋巴细胞增殖、诱导凋亡中的作用及其机制
牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是在世界范围内对养牛业造成巨大经济损失的重要传染病,也是规模化养牛场和国际贸易中重点检疫的牛传染病。牛病毒性腹泻病毒(BVDV)急性感染可导致牛外周血淋巴细胞(PBL)减少、凋亡和免疫抑制。
在慢性病毒感染过程中PD-1信号通路可以介导协同抑制信号,抑制T淋巴细胞的活化、增殖,诱导凋亡。然而,在急性病毒感染中PD-1通路对T细胞的调控作用并不明确。
尤其是在BVDV急性感染中PD-1通路是否参与调控了PBL的减少和凋亡,促进免疫抑制的形成,尚不明确。为了确定PD-1通路是否与BVDV急性感染导致的牛PBL减少和凋亡具有相关性。
首先,采用梯度密度水平离心法从BVDV急性感染牛颈静脉抗凝血中分离外周血单个核细胞(PBMC),再通过免疫微珠法从PBMC中分选出PBL和CD14~+外周血单核细胞(PBM),qRT-PCR和Western blot检测两种细胞亚群的PD-1和PD-L1表达水平,流式细胞术检测PBL凋亡,CCK-8法检测PBL增殖。其次,选择CP型BVDV-1 NAD ...


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