(6)改良的SLS(Sodium Lauroyl Sarcosine
十二烷基肌氨酸钠)方法提取玉米
DNA操作流程:
取3-5 g
新鲜的玉米叶片
于1.5 mL
离心管中,液氮速冻后用研磨棒研磨
。加700 L SLS
提取液,涡旋振荡
3-5min,混匀。加700 L
酚:氯仿:异戊醇(
25:24:1
),轻轻颠倒混匀。
4℃,12,000 r
pm,离心1min。将上清转入新的离心管中,加入等体积异丙醇轻轻摇晃
1-2min,-20℃,静置10-20
min。4℃,12,000 rpm
,离心6~8min,弃上清,用
75%乙醇洗涤
。重复6)。4℃,12,000 rpm
,4 min
,倒上清,将离心管倒扣于吸水纸上,
晾干DNA。加TE或超纯水溶解
DNA。对上述DNA进行测量,稀释到
20-200 ng/L
后-20℃储存备
用。附:1000mL
SLS提取液配制方法:
10%SLS100mL
(10 g
固体)0.2 mol
/LEDTA
100 mL
(7.4 g
,pH=8.0
)1 mol
/LNaCl 100 mL
(5.85 g
)1 mol
/LTr ...


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