肠杆菌科细菌耐药机制以及UPEC对HeLa细胞的致病性研究
目的研究临床分离的产酸克雷伯菌和阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药和/或敏感性降低的分子机制。方法临床分离到一株对碳青霉烯类抗生素耐药的产酸克雷伯菌ZC101和一株对碳青霉烯类抗生素不敏感的阴沟肠杆菌ZY106。
采用琼脂稀释法进行抗生素最低抑菌浓度(MIC)的测定。以大肠杆菌EC600或C600作为受体菌进行接合实验。
等电聚焦电泳(IEF)检测产酸克雷伯菌ZC101、阴沟肠杆菌ZY106和它们的大肠杆菌接合子产β-内酰胺酶情况。PCR和DNA测序确定耐药基因的基因型。
质粒消除实验证实外膜蛋白缺失是否可以引起对碳青霉烯类抗生素感性下降。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析产酸克雷伯菌ZC101外膜蛋白表达情况,并对OmpK35和OmpK36基因进行PCR扩增和DNA序列分析。
Urea-SDS-PAGE分析阴沟肠杆菌ZY106的外膜蛋白表达情况。结果亚胺培南、美罗培南和厄他培南对产酸克雷伯菌ZC101的MIC分别为16μg/ml、16μg/ml和128μg/ml;对阴沟肠杆菌ZY106的MIC分别为2μ ...


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