齐鲁医学免疫荧光法(IFA)检测人血清IgG抗体

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附件3免疫荧光法（
IFA）检测人血清
IgG抗体试验材料：
（1）抗原片：家鼠型和姬鼠型汉坦病毒标准毒株感染
Vero E6
或Vero
细胞制备，低温干燥保存；
（2）阳、阴性对照：单克隆抗体或确诊阳性病患
恢复期血清（阳性对照）、阴性血清；
（3）羊抗人（或兔抗人）
IgG荧光抗体；
（4）常用稀释液：
pH7.2
～7.4PBS
、伊文思兰等；
（5）荧光显微镜。
检测步骤：
（1）用pH7.4
，0.02mol/L
PBS稀释待检血清，从
1:20
开始做2倍或4倍连续稀释至需要的稀释度。
（2）取出抗原片，用蒸馏水漂洗后，冷风吹干。
（3）用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清，加入量以覆盖细胞抗原面为准（若为双份血清，最好上排为急性期血清，下排为恢复期血清），在
37℃水浴箱湿盒孵育
30～40分钟（每次试验同时设阳、阴性对照）。
（4）用PBS震荡洗涤
3次，每次
5分钟，再用蒸馏水洗涤
1次脱盐，冷风吹干。
（5）用含1：3万的伊文思兰
PBS按工作浓度稀释荧光结合物，滴加各孔（以覆盖细胞抗原面为准），在
37℃水浴箱湿盒孵育
30分钟，然后同（
4 ...

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关键词：IFA vero PBS 蒸馏水 伊文思