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雷达卡
人源尘肺病噬菌体单链抗体库的构建和初步鉴定
研究背景尘肺病目前仍是中国职业病中发病率最高、死亡危险性较大、对劳动者危害最严重的一类,迄今尚无将其消除或逆转的根治方法,只能根据病情进行综合医治以减轻症状、延缓病情进展,因此,积极预防并尽早诊断对于增进病人生存质量及延长寿命尤为重要。迄今为止,国内外已经对尘肺病进行了大量的相关研究,但尘肺病的形成机制目前还不十分清楚,不仅尘肺病所致肺组织纤维化尚无消除或逆转的根治方法,也缺乏接尘人群健康监护、早期预警及尘肺病早期发现的有效生物监测指标,诊断仍然依靠达到一定病理程度后的x线表现。
进一步探索尘肺病的发生、发展和演进过程,筛选和鉴定出能够反映粉尘接触、尘肺病进程的生物标志,对解释尘肺病发病分子机制、进行尘肺发病的早期预警和诊断以及研究阻止纤维化进展的干预靶点,都具有积极的意义和作用。目的利用噬菌体抗体库技术,构建人源尘肺病ScFv噬菌体单链抗体库,为尘肺病生物标记筛选打下基础。
方法首先分离尘肺病人外周血淋巴细胞,提取总RNA,反转录合成第一链cDNA,采用兼并引物利用半巢式PCR扩增抗体重链(VH)和轻链可变区(VL)基因。使用带有粘端的Li ...
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