丙泊酚对脂多糖刺激人单核细胞分泌细胞因子的影响
丙泊酚对脂多糖刺激人单核细胞分泌细胞因子的影响目的在LPS刺激人外周血单核细胞释放细胞因子的基础上,观察不同浓度的丙泊酚对LPS刺激引起的促炎细胞因子TNF-a、IL-6和抗炎细胞因子IL-10释放的影响,检测单核细胞表面TLR4的表达变化,探讨丙泊酚对细胞因子分泌的影响作用及其可能机制。方法1.通过密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,在塑料平皿中贴壁后获取细胞,通过瑞吉氏染色、非特异性酯酶染色和荧光标记的抗人CD14抗体鉴定获取的细胞,并测定细胞存活率。
2.用RPMI1640培养基重悬细胞,置于48孔板,调整终浓度至5×10<sup>5</sup>/500μl/孔,观察LPS刺激单核细胞产生细胞因子的量效和时效关系。1)观察LPS刺激单核细胞产生细胞因子的量效关系:用不同浓度(阴性对照、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和1000ng/ml)LPS刺激单核细胞24h,离心收集上清,用ELISA法检测上清中TNF-a、IL-6和IL-10的浓度。
2)观察LPS刺激单核细胞产生细胞因子的时效关系:用10ng/ml的LPS刺 ...


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