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粪生链霉菌HLF-43的代谢功能改造与突变株新产抗肿瘤活性产物研究
多年来,放线菌在新药开发资源中一直占据着非常的重要地位。然而大多数从自然界中分离得到的放线菌菌株在现有活性筛选模型下未能表现出活性,因此,如何改造无活性放线菌的代谢功能而使其最终成为活性化合物产生菌是极具深远意义的课题。
核糖体工程是一种利用抗生素抗性筛选方法获取高产突变株的有效方法,它采用传统的抗性筛选方法即使在菌株遗传信息不明确的条件下仍然能够获得高产突变株,但该筛选方法是以自发突变为基础的,而自发突变的低突变率不可避免地造成了研究工作中时间和资源的浪费,因此,本文在活性化转化无活性放线菌与提高菌株突变率的双重需求下,相继建立了微波诱变结合新霉素抗性筛选、磁性纳米粒子辅助微波诱变结合新霉素抗性筛选、磁性纳米粒子辅助微波诱变结合混合抗生素抗性筛选等三种可用于无活性放线菌活性化转化的实验技术新方法。将以上三种方法分别运用于无活性粪生链霉菌野生株HLF-43（1000μg/mL样品对K562细胞的抑制率为3.9%）,成功获取了多株突变株,并通过突变株发酵产物对K562细胞的增殖抑制活性测试,最终取得多株活性突变株。
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