Western-Blot实验(蛋白质印迹法)课件

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WB实验细节详述
时间：2016-05-07
一：蛋白定量（实验前处理）
组织：到手的组织状态：冰袋快递：组织腐烂，蛋白含量减少            干冰快递：基本无影响            甲醛处理：石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒    需用匀浆器，液氮等方法加入1*PBS充分研磨    裂解液量：组织（g）：裂解液（ml）=1:10 细胞：一般为细胞悬液实验前需确定细胞大概浓度    裂解液量： 107数量细胞加入1ml裂解液         
一：蛋白定量（裂解液详述）
裂解液使用时加入PMSF：1ml裂解液加 1ulPMSFPMSF（苯甲基磺酰氟）是一种蛋白酶抑制剂，可抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）PMSF在水液体溶液中不稳定，见水易分解，需使用前加入。

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关键词：Western Wester Stern west Est