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超声微泡负载自杀基因HSV1-TK联合前药更昔洛韦对前列腺癌细胞抑制效应的研究
目的：观察低频超声波辐照脂质微泡造影剂携单纯疱疹病毒I型胸昔激酶(HSV1-TK)基因体外转染及联合前体药物更昔洛韦(GCV)对前列腺癌细胞株PC-3的抑制效应。方法：使用低频超声波辐照（声强1.0W/cm2,频率为1MHz，辐照时间分别为0、30、60、90、180s）前列腺癌PC-3细胞，MTT法筛选出最适辐照时间；将含有HSV1-TK基因的质粒通过静电吸附在脂质微泡表面，采用以上筛选出的最适超声辐照时间进行转染，实验分为4组：对照组、单纯质粒TK组、超声辐照+质粒TK组、超声辐照+微泡+质粒TK组。
转染后分别于48h、72h用倒置荧光显微镜及蛋白质免疫印迹法（WB）观察TK基因的转入及蛋白表达。蛋白质免疫印迹法：提取总蛋白、浓度测定，加入上样缓冲液煮沸；配胶、上样，电泳、转膜，封闭、一抗4℃孵育过夜，TBST洗涤；HRP标记的二抗37℃孵育1h，TBST洗涤；显影、摄片。
MTT法观察使用不同浓度的前体药物更昔洛韦（GCV）后对细胞增殖抑制率；使用流式细胞仪（FCM）检测最适浓度的前体药物GCV对转 ...
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