Trizol法提取RNA

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Trizol
法提取RNA注意：全程戴口罩，手套（
PE手套，胶皮手套），离心注意放置方向。
所用所有物品全部为灭
RNA酶的。器材：试剂：Trizol
β—巯基乙醇
氯仿75%乙醇DEPC
水TAE Buffer 0.8%
琼脂糖凝胶
收集细胞：
取对数期藻液
（2ml）(2x4x10
6=8x10
6个)，2500 r
，3 min
离心，弃上清。将沉淀转移至研钵中，锡纸包裹，
-80℃过夜。
将固体藻取出，
研磨至细粉末状
，加入1 ml Trizol
，室温放置
5min。加入0.2 ml
氯仿，涡旋15 sec
，（剧烈震荡混匀
），室温静置
3min，4℃，12000 rpm
，15min离心。样品分三层
，取上清至干净离心管
。RNA沉淀：加入
0.5 ml
异丙醇，上下
轻轻混匀，室温放置
20 min
，4℃，12000 rpm
，10 min
离心。出现凝胶状沉淀
RNA洗涤：弃上清，加入
至少1 ml 75 %
乙醇，漩涡
充分，4℃，7500 rpm
，5 min
离心，弃上清，室温干燥
5 min
。重新溶解
RNA:
加入50 ul RNase-free
水 ...

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关键词：TRIZ Buffer Free Min 取对数