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尼古丁和双酚A对胚胎干细胞定向心肌分化的影响及其机制研究
先天性心脏病(先心病)是目前最常见的一种出生缺陷,并发症较多,严重威胁患儿的生命,对社会和家庭造成了极大的影响。已有研究表明,遗传因素和环境因素是导致先心病的两大主要致病因素。
这两种因素单独作用或者相互作用均可使胚胎心脏发育异常。因此,深入研究先心病的发病机制以控制其发病率显得极其重要。
大量的研究发现,香烟中的尼古丁和环境中无处不在的双酚A均可对心血管疾病以及胚胎发育产生影响。本课题组前期的研究表明,孕期大鼠给予高剂量的尼古丁能够导致子代大鼠心脏间隔缺损,可能与心脏特性转录因子GATA4、TBX5启动子区域DNA的甲基化升高有关,为了进一步探索尼古丁和双酚A可能引起先心病的分子机制,我们开展了以下研究。
研究方法:1、通过单层分化的方法,诱导人胚胎干细胞hESC-H9定向分化为心肌细胞,并将其作为体外胚胎心脏发育的模型。通过探索最佳的分化条件,使胚胎干细胞能高效而稳定地分化为成熟的、有自动节律的心肌细胞。
2、通过CCK-8实验确定尼古丁干预分化过程的最适浓度,观察不同浓度的尼古丁对干细胞心肌分化的影响,采用荧光定量PCR( ...

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关键词：干细胞 双酚A 尼古丁 心血管疾病 发病机制