亚洲玉米螟Ⅲ家族几丁质酶的克隆表达与生化性质表征
几丁质作为其表皮的主要成分,对昆虫的生存至关重要。昆虫体内的几丁质需要不断被合成和降解以满足其生长发育的需要。
几丁质酶是几丁质降解过程中的关键酶之一。昆虫几丁质酶分属10个家族,其中Ⅲ家族几丁质酶经预测为膜结合蛋白,并且具有独特的结构域组成,含有两个催化域和一个几丁质结合域。
由于该酶的生理重要性已被RNA干扰实验所证实,因此有可能成为绿色农药靶标。然而,该酶在家蚕的蜕皮液中没有发现,其具体生理功能还是未知。
本论文以重要农业害虫—亚洲玉米螟Ⅲ家族几丁质酶OfChtⅢ为研究对象,开展克隆表达及酶学性质研究,为阐明其生理功能提供了思路。本论文包括以下研究内容:(1)通过PCR及RACE克隆了亚洲玉米螟Ⅲ家族几丁质酶OfChtⅢ基因,分析其cDNA序列,OfChtⅢ全长4193-bp,其中编码区编码987个氨基酸,N端含有一个长度为23 AA的跨膜区域。
OfChtⅢ含有两个催化域(CAD),一个几丁质结合域(CBD),进化分析OfChtⅢ属于Ⅲ家族昆虫几丁质酶分支。(2)在毕赤酵母GS115中成功重组表达亚洲玉米螟Ⅲ家族几丁质酶的两个催 ...


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