海参肠道β-1-3-葡聚糖酶的提取、纯化及其特性的研究

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海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取、纯化及其特性的研究
水生动物消化、利用所摄取营养物质的能力取决于存在于其肠道内的消化酶类。海参营养丰富,还含有很多生物活性物质,是一种非常重要的经济水产动物。
对海参肠道消化酶的研究对了解海参消化、促进海参养殖提供了科学的依据。p-葡聚糖酶是最重要的消化酶之一。
本文通过对海参肠道p-1,3-葡聚糖酶的提取、纯化及酶学性质的研究,优化了海参肠道p-1,3-葡聚糖酶的最佳提取条件；建立了包括阴离子交换层析、疏水层析、PAGE-凝胶电泳在内的酶分离纯化方法；研究了提纯酶的分子量及酶学性质。实验结果表明,海参肠道p-1,3-葡聚糖酶的最佳提取条件为：含0.05mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液(pH6.0)；缓冲液：海参肠(v／w)=4：1；盐析时硫酸铵饱和度为80%。
经DEAE-Sepharose CL-6B、Butyl-Sepharose4Fast Flow和Native-PAGE电泳后,提纯酶酶活力相对于粗酶纯化了23.24倍,经SDS-PAGE测定分子量约为37.5kDa。该酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为5.0,在不高于40℃,pH5 ...

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