异种克隆牦牛,羚牛及相关机理的研究
在保护濒危动物和进行核质互作分析方面,异种克隆技术是非常有效的方法。本研究利用牛卵母细胞作为受体,通过显微操作与牦牛或羚牛体细胞构建异种重构胚,将牦牛的异种重构胚移植到代孕牛中,获得了妊娠,并有望于2004年6—7月间出生。
此外本研究还对异种克隆技术和异种体细胞核重编程进行了初步探讨。 1 供体细胞的培养:本实验从北京动物园、青海互助县、秦皇岛野生动物园分别采集了羚牛和牦牛组织样,建立了21个细胞系。
细胞系种类包括耳成纤维细胞、输卵管上皮、颗粒细胞系三种。实验证明样品采用0℃保存48小时,对细胞系的建立无负面影响。
这为野外收集珍稀动物组织,建立细胞系提供了切实可行的方法。 2 体细胞克隆技术基础平台的建立:首先,在去核方法上,本实验比较了H33342染色法,盲吸法和高渗法并结合这三种方法作了优化,形成本实验的去核方法:其次,本实验利用牛卵母细胞孤雌激活的方法,比较了四种激活方法,发现利用复合激活方法比单个化学试剂激活效率高(83.6、68.7:45、62.5),而在复合激活的方法中以A23187+6-DMAP激活效率较高(分裂率,83.6);最 ...


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