PCR引物流程设计详解

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PCR引物设计
流程详解
本文目的：复制出IL-4基因片段
查找基因序列
进入NCBI主页，下拉选框选择Nucleotide，在搜索栏输入要查找的目的基因，即IL-4，点击搜索
2 、在搜索结果选择灵长类（
Homo sapiens
）在灵长类IL-4基因中选择需要的mRNA序列
查看基因的相关信息
外显子区域
CDs区域
点击FASTA
格式，并将序列保存到文档
使用primer premier 5.0设计引物
建立新文件，将所得的序列复制进输入框内
点击搜索按钮，搜索引物
设置引物设计参数（因为在之前查找基因序列的时候获知，外显子区域分别为：1-200、
201-248、
249-425
、426-618，又知在引物设计时引物位置最好跨越一个内含子，PCR产物长度通常为100-150bp，故设定上游引物位置为201-248，下游引物位置为249-425，产物长度为100-150bp
）4、确认条件后，显示搜索结果
双击选中得分最高的引物查看引物情况
（上图为上游引物情况，下图为下游引物情况）
将设计的
上下游引物复制出来，保存到文档中
使用oligo 6.0对设计的引物进行评价
建 ...

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关键词：流程设计 PCR Premier Primer fasta