柑橘DNA和RNA提取方法

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CTAB
法提取柑橘
DNA参考自：
程运江.柑橘体细胞胞质遗传及叶绿体
SSR引物开发研究
[D].
华中农业大学
,2004.
实验准备工作：
1所用离心管、枪头要洗净、烘干（最好灭菌）。
2试剂配制：
1 M Tris-HCl (pH 8.0):
称取Tris-Base 121g,
加入约800 ml
水在磁力搅拌器上搅拌，使其充分溶解后加入浓盐酸调整
pH至8.0后加水定溶至
1000 ml.
灭菌后于室温保存。
0.5 M EDTA (pH 8.0)
:称取EDTA-Na
2盐187 g
加入约800 ml
水，在磁力搅拌器上边搅拌边加入固体
NaOH
，当EDTA
和NaOH
均完全溶解，溶液变清时其
pH值刚好达到
8.0左右，再用
pH试纸略加调整即可
,灭菌后于室温保存。
5.0 M NaCl:
称取NaCl 300 g,
加入蒸馏水约
800 ml
于磁力搅拌器上充分搅拌，约
5分钟后停止搅拌，静止
2~3分钟，倒出上清液，再加入
100 ml
蒸馏水重复前面的步骤，直到
NaCl
充分溶解后定溶至
1000 ml.,
灭菌后于室温保存。
酚：氯仿：异戍醇（
25： ...

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关键词：DNA 华中农业大学 Base 开发研究 NAC