病毒接毒及其后续管理

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病毒（TuMV
）接种及其后续管理
1病毒接种
1.1浸润接种——侵染性克隆
（1）浸润选择健康无胁迫植株，如发生难以浸润现象，应弃置不用。
（2）浸润前将需要的农杆菌菌株在平板上活化，平板继代培养
2次，液体培养基可多次继代培养，活化之后的农杆菌在
1周之内使用。
（3）农杆菌以平板形式保存不超过
1月，平板继代不超过
2次。（4）-80℃保存时应注意采用高浓度（
10×）保存，以
甘油：液体培养基
保存。（5）选取对应
PDS指示的完全白化的两片叶子（一般为第
3、4片），进行浸润接毒。一般以接毒
2片叶子为宜。应完全浸润，不宜用注射器在同一片叶上注射次数过多，一般
2次为宜，以防浸润叶坏死。
1.2摩擦接种
（1）摩擦接种一般在
VIGS
后7-12
天左右，
PDS至少有3-4片叶子完全白化。
（2）摘取感病植株叶片（最好是系统叶），置于研钵，滴加少许
PBS，研磨成均匀液体。
（3）选取对应
PDS指示的完全白化的两片叶子（一般为第
3、4片），洒少许金刚砂，进行摩擦接毒。一般以接毒
2片叶子为宜。金刚砂不宜洒过多，也可将
金刚砂洒于植物汁液，不时搅拌。
（4）摩擦接毒时，尽 ...

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关键词：培养基 PBS tum 注射器