Cre-LoxP重组酶系统
1.Cre重组酶
1981年从P1噬菌体中发现,Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp,编码由 343 个氨基酸组成的38kDa单体蛋白。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能识别特异的 DNA 序列,即 loxP 位点,使 loxP位点间的基因序列被删除或重组。Cre重组酶有70%的重组效率,不借助任何辅助因子,可作用于多种结构的 DNA 底物,如线形、环状甚至超螺旋 DNA。它是一种位点特异性重组酶,能介导两个LoxP位点(序列)之间的特异性重组,使LoxP位点间的基因序列被删除或重组。
2.LoxP序列
是由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成,8bp的间隔序列同时也确定了LoxP的方向。Cre在催化DNA链交换过程中与DNA共价结合,13bp的反向重复序列是Cre酶的结合域。其序列如下: 5' - ATAACTTCGTATA - GCATACAT - TATACGAAGTTAT - 3' 3' - TATTGAAGCATAT - CGTATGTA - ATATGCTTCAATA - 5'


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