19-酶的分离纯化及酶学性质研究

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酶的分离纯化
---介绍酶分离纯化的步骤、原则和评价方法
 酶的分离提纯
酶分离纯化的目的：研究酶的性质、作用、反应动力学、
结构与功能的关系、阐明代谢途径；作为生化试剂和药物。
酶提纯主要包括：  酶制剂的浓缩；
       杂蛋白和杂质的去除
分离纯化方法的衡量指标
总活力回收；
比活力提高的倍数。
  材料  机械、化学，组织/细胞  酶总活力
  处理  破碎,蛋白质释放    比活力
       离心
酶    缓冲液、离子浓度pH，蛋  酶总活力
  抽提             回
的    白质溶解到缓冲液，   比活力
                收
分      离心
                率
离  分离
     盐析、有机溶剂、等电点  酶总活力
提    、吸附、超滤，缩小体积  比活力  纯
纯               化
     离子交换、凝胶过滤、疏
过            酶总活力  倍
     水层析、亲和层析、高效
程  纯化         比活力  数
     液相、快速蛋白质液相层
  ...

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关键词：衡量指标 离子交换 生化试剂 评价方法 蛋白质