石蜡切片免疫组化操作步骤(精品文档).docx

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石蜡切片免疫组织化学操作流程
一、组织获取（本实验室多做脑组织，所以以脑组织为例）
1.动物麻醉：所用麻醉药物（水合氯醛水溶剂）剂量为    350mg/kg动物体重，常用麻醉药
  物浓度为 5%、6%、7%、10%（麻醉浓度越大，动物进入麻醉时间越短，但麻醉致死率
  相应较高，本人使用 7%浓度，若注射位置正确，约 3min进入麻醉状态）；动物麻醉后，
  将其固定于灌流操作平台，仰卧位；
2.动物灌流手术：以胸骨剑突为起点，沿左右两侧肋下缘剪开老鼠皮肤至腋下，再次以
  剑突为起点，剪开皮下肌肉层，沿同样方向剪开肌肉至腋下，避免伤到内部脏器，剪
  破膈膜，沿左右两侧剪断胸骨，用止血钳夹住剑突向上翻转，充分暴露心脏；用弯镊
  分离心脏表面黏膜；左手持止血钳轻夹起心脏，倾斜一定角度，使心尖方向与升主动
  脉尽量位于同一直线上，右手持灌流针，沿直线所在所在角度由左心室进针，将灌流
  针直接插入升主动脉（可挑动灌流针于升主动脉内观察是否正确插入，此方法操作不
  熟练易插错血管或是直接刺穿心脏——或者直接将灌流针插入左心室，但前方法灌流
  效率较高）；固定器械（器械松动或是位 ...

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