茜素红染色
成骨分化是干细胞的一个重要特性。在特定的诱导培养基作用一段时间后,干细胞可分化为成骨细胞,在细胞表面沉积钙盐,形成钙结节。应用茜素红的复合物,可用于鉴定干细胞是否已成功向成骨细胞转化
实验目的:通过茜素红染色检测细胞成骨分化
实验原理:
1.成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来,即“钙结节”,鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。
2.茜素红:茜素磺酸钠,茜素
S,茜素红
S,茜素胭脂红,
1,2-
二羟基蒽醌
-3-磺酸钠,
1,2-
二羟基蒽醌
-3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯和氯仿。
1%水溶液pH为2.15
,其水溶液呈前黄褐色,加盐酸后变为黄色,加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成有色化合物,能与锆、钍、铝、钛及钙发生显色反应。
3.染色原理:茜素红与钙发生显色反应,产生一种深红色的带色化合物,这样成骨诱导的细胞外面沉积的钙结节也就被染成了深红色。
三.实验试剂及仪器
1.试剂:PBS 10%
甲醛缓冲液
0.1%
茜素红-Tris-HCL
染液蒸馏水2.仪器:倒置显微镜
实验步骤
1.弃培养液,
...


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