水稻愈伤组织的诱导
一、实验目的
1、掌握外植体的消毒方法和接种技术;
2、了解愈伤组织诱导的过程。
二、实验原理
以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时,在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。愈伤再经分化培养,通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。
外植体源自自然环境均为带菌状态,在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料,有时要几种消毒剂配合使用;对于多茸毛表面粗糙不平的材料,要加展著剂(吐温
20)以增强消毒效果。
三、实验材料与用具
1、材料:水稻成熟种子(用于诱导愈伤组织);
2、试剂:
75%酒精,2% NaCLO
,无菌水
(每组1瓶400mL)
;3、培养基:
诱导培养基:
NB+2,4-D 2mg/L+
蔗糖30g/L+琼脂8g/L(pH5.8
);4、仪器设备:培养室、超净工作台、培养皿(
¢9cm)2个、枪形镊、
量筒(100mL
)2个、三角瓶(
50mL
、无菌)
2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。
四、实验步骤
1、接种室、培养基及用具表面消毒
用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子,将培养基及用具放工作台,打开紫外灯,照射
20 ...


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