韭蛆内参基因筛选及关键解毒酶基因克隆与转录表达特性研究

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韭蛆内参基因筛选及关键解毒酶基因克隆与转录表达特性研究
韭蛆是危害多种蔬菜的主要害虫,在我国多个省份均有报道,是蔬菜生产的大敌。韭蛆又称根蛆主要危害韭菜,因栖居在韭菜根部,防治极难。
随着菜农对化学农药的滥用和过分依赖,韭蛆的选择压力,其对各种化学药剂的抗性逐渐增强,使得韭蛆的防治受到的艰巨的挑战。而分子生物学方面的研究尚未见报道,昆虫的解毒酶系在其抵抗外界环境胁迫起到极其重要的作用。
对其解毒酶机制中的关键解毒酶基因对不同靶标农药的表达水平的了解,有助于在分子水平上,尤其是从生态友好的角度上对昆虫的防治提供一定的科学依据。本文以高通量Illumina Hiseq 2000获得的韭蛆转录组为背景,对不同处理样本的韭蛆内参引物进行了系统的筛选,并对韭蛆ABC转运蛋白、细胞色素P450氧化酶系(CPY)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和非专一性酯酶(ESTs)关键解毒酶基因进行克隆,同时对其4种解毒酶基因在辛硫磷、毒死蜱、吡虫啉、氟嘧啶不同胁迫时间下的转录水平进行研究,具体结果如下:1.应用Real-Time PCR技术,在内参基因的筛选中对RPL10、EF1α、G6PDH、UBC、AC ...

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关键词：Real-time Illumina 分子生物学 科学依据 Real