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1）称取蛋白胨（
peptone
）2.5g
，琼脂20g，NaCl
3g，置于洁净
2000mL
玻璃三角瓶，加入蒸馏水
975ml
，120℃高压蒸汽灭菌
30min
，之后置于
55℃水浴锅中冷却。
2）依次加入
5mg/ml
胆固醇（乙醇溶解，不灭菌）
1ml，高压灭菌的
1MMgSO4
，1MCaCl2
，1MKPO4
缓冲液（
pH6.0
）各1ml，摇匀即可。1MKPO4
缓冲液的配置方法为：称取
108.3g
KH2PO4
和35.6g
K2HPO4
，溶于1000mL
蒸馏水中，调节
pH值到6.0即可。1.3倒板1）倒平板在无菌条件下进行，应保证倒入每个无菌培养皿（直径
6cm）的培养基量基本一致，否则平板的厚薄相差太大将会影响观察。也可以用移液器分装
8-9ml
到每一个培养皿中
，保证每个平板厚度基本一致
。2）将倒好的平板在室温下放置
1~2天，一方面可以检验是否有污染，一方面让水汽晾干，
之后可倒置于4℃保存备用。
菌液测试：因为
OP50
菌株是无抗性的，所以在大批量铺菌前需进行菌液测试的。
1）将扩增好的
OP50
菌液摇匀，用移液器吸取约
20uL
至 ...

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关键词：ACL 蒸馏水 NAC 胆固醇 大批量