试验用具
一、材料和标本 乳鼠、HeLa细胞(人宫颈癌细胞)二、器材和仪器 手术器械、平皿、培养瓶、吸管、离心管(灭菌后备用)、酒精灯、烧坏、超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜。三、试剂 含有5%小牛血清MEM培养液、0.01mo1/L PBS,0.25%胰蛋白酶/0.02%EDTA混合消化液、75%乙醇。
试验内容
一、原代细胞培养 (一)原理细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题研究。由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养。原代培养细胞离体时间短,性状与体内相同,适合用于研究。普通说来,幼稚状态组织和细胞,如:动物胚胎、幼仔脏器等更轻易进行原代培养。
试验方法
单层细胞培养法 酶消化组织使其分离成单个细胞或较小细胞团,接种培养。组织块培养法 把组织小块(0.5-1mm3)直接贴附培养瓶壁,细胞自组织块边缘向外长出生长晕,最终连接成片形成单层细胞。此次试验采取组织块培养法。


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