齐鲁医学BCA法测蛋白浓度

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【目的】
：掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。
【原理】
：BCA(bicinchonininc acid)
与二价铜离子的硫酸铜等其他
组成的，混合一起即成为苹果绿，即
BCA工作试剂。在碱性条件下，
BCA与蛋白质结合时，蛋白质将
Cu2+还原为Cu+，一个Cu+螯合二个
BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。
【操作】
标准曲线的绘制：取试管七支、编号，按下表操作：
【计算】
（一）绘制标准曲线。
（二）以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度
(g/L)
。（三）再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度
(g/L)
。【优缺点】
(一)操作简单，快速，
45分钟内完成测定，比经典的
Lowary
法快4倍且更加方便；
(二)准确灵敏，试剂稳定性好，
BCA试剂的蛋白质测定范围是
20-200μg/ml
，微量BCA测定范围在
0.5-10μg/ml
。(三)经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量；
(四)抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响
【器材】
...

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关键词：蛋白质 苹果绿 Inc CID ICI