发帖
雷达卡
体外动态灌注OECs-DBM预血管化与受区血管融合机制研究
[目的]探讨在体外通过动态灌注系统培养晚期内皮祖细胞-脱钙骨基质复合体,对晚期内皮祖细胞在脱钙骨基质上的铺展粘附、增殖、分化和基质孔隙中成管能力的影响及其可能的机制。探讨动态灌注预血管化的晚期内皮祖细胞-脱钙骨基质复合体的血管在体内与受区血管可能的融合机制。
[方法]1.密度梯度离心法分离培养人外周血晚期内皮祖细胞,并通过细胞形态观察,流式细胞检测,结合凝集素及摄取乙酰化低密度脂蛋白实验和Matrigel基质胶体外成管实验对细胞进行综合鉴定。分别用10/30/50/70/100 MOI值的慢病毒介导eGFP试转染OECs,计算细胞转染效率,MTT比色法绘制不同MOI值下晚期内皮祖细胞的生长曲线,并与对照组细胞进行比较,优选出最优的MOI值,挑选耐嘌呤霉素单细胞克隆并扩增培养建立稳定细胞株,并判断其对晚期内皮祖细胞的增殖、细胞表面标记及体外成管特性有无影响。
2.构建体外动态灌注培养系统,将eGFP慢病毒稳定转染晚期内皮祖细胞株接种于脱钙骨基质上,分别进行静态接种培养、动态灌注培养和抑制剂实验,通过荧光显微镜实时动态观察eGFP ...
京公网安备 11010802022788号
