[学习资料] 出血性大肠杆菌(EHEC)O157H7效应蛋白NleL和宿主蛋白ZBED1相互作用的发现与验证 [推广有奖]

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ruhemiadui 发表于 2025-12-8 18:05:09 |AI写论文

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出血性大肠杆菌（EHEC）O157:H7效应蛋白NleL和宿主蛋白ZBED1相互作用的发现与验证
出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7是一种食源性和水源性的病原菌，该菌通过III型分泌系统将效应蛋白注入至宿主细胞中产生粘附与脱落（A/E）损伤而致病，它的感染会导致出血性肠炎并极有可能出现致命的出血性尿毒综合症，是一种全球范围内高度关注的病原菌。NleL(non-lee-encoded-effector-Ligase)是由Ⅲ型分泌系统分泌的一种具有真核细胞泛素化E3连接酶活性的效应蛋白，然而它在宿主细胞内的底物和作用机制尚不清楚。
本文通过蛋白质表达重组子的构建、蛋白质的诱导表达与纯化、蛋白质细胞内定位、酵母双杂交、GST pull-down和体外泛素化等实验方法来筛选和验证效应蛋白NleL在真核细胞内的相互作用蛋白，取得了以下结果：1.酵母双杂交实验筛选NleL可能作用于宿主的底物蛋白ZBED1酵母双杂交实验初次筛选出可能与效应蛋白NleL相互作用的真核宿主细胞蛋白ZBED1，在SD-2和SD-4板均能生长的阳性克隆，经扩增、双酶切、测序分析比对后，发现的确是ZBED1序列，可初步 ...