大熊猫和泡菜样品来源魏斯氏菌的益生特性分析

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大熊猫和泡菜样品来源魏斯氏菌的益生特性分析
目的分离鉴定来自成都大熊猫粪便及湖南泡菜样品中的魏斯氏菌(Weissella),并对其益生性质进行分析。材料与方法(1)使用菌落观察法、生理生化鉴定法及16S rRNA鉴定法对来自大熊猫粪便及泡菜样品的魏斯氏菌进行分离鉴定。
对分离鉴定出来的魏斯氏菌进行耐酸和耐胆盐实验,并测定其β-葡糖苷酶活性,探讨魏斯氏菌的益生性质。(2)通过PCR扩增魏斯氏菌基因组中的β-葡糖苷酶基因,连接电转化到大肠杆菌(Escherichia coli DH5α)后提取质粒送成都擎科梓熙生物技术有限公司测序。
将β-葡糖苷酶基因的PCR扩增片段和克隆载体pET22b双酶切后进行连接,电转化到大肠杆菌(E.coli BL21)。IPTG诱导重组酶的表达并测定其酶活,对包涵体表达的重组酶进行纯化复性。
(3)对分离鉴定的魏斯氏菌提取质粒,胶回收分离纯化质粒条带,将纯化后的质粒进行测序,并对测序结果进行序列分析。结果(1)从大熊猫粪便样品中分离出1株食窦魏斯氏菌(W.cibaria),从泡菜样品中分离出4株融合魏斯氏菌(W.confusa)。
5株魏斯氏菌均能发酵纤维二糖 ...

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