几丁质酶基因在烟草中表达及对真菌病害的抗性研究
“烟草转几丁质酶基因研究”论文,从外源几丁质酶基因的克隆与表达;转几丁质酶基因烟草的几丁质酶活性;激光共聚焦显微镜扫描对所转基因进行定位;转几丁质酶基因烟草当代及后代对烟草炭疽病和赤星病的抗病性;外源几丁质酶基因在转基因烟草后代中的遗传稳定性,转基因烟草植株及其调制后烟叶的转基因成分的检测方法,人工接种病毒鉴定转基因烟草对病毒的抗性等方面进行了系统的研究。 1.外源几丁质酶基因的克隆及其在烟草中表达研究 首先应用多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)将来源于baculovirus(Autogragp californica multiple nuclear polyhedrovirus,AcMNPV)的几丁质酶基因进行体外扩增,并将其插入pROK-2质粒中,再用重组质粒pROK-2 DNA转化大肠杆菌(Escherichia coli)XL1 Blue。
用冻融法将重组质粒DNA转入土壤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404菌株中,然后用转化的土壤农杆菌LBA440 ...


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