茶叶浸提物对功能性酶活性和二级结构的影响研究
本文研究了绿茶、铁观音、红茶和六堡茶浸提物及茶多酚对血管紧张素转化酶(ACE)、胰脂肪酶(PPL)和胰α-淀粉酶(PPA)等三种功能性酶活性的影响,并选取PPL和PPA,研究其与茶源物质相互作用后紫外差示光谱、荧光猝灭光谱和圆二色谱的变化。首先比较了紫外可见光法和高效液相色谱法对研究茶多酚ACE活性的适用性,得出一种直接进样、等梯度洗脱便能达到良好分析效果的RP-HPLC测定方法。
以马尿酰-组氨酰-亮氨酸(HHL)为反应底物,ACE为催化剂,反应所生成的马尿酸为测定指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。使用Intersil ODS-3色谱柱(4.6mm i.d.×250mm,5μm),柱温35℃,流动相为甲醇-超纯水(体积比35:65,各含0.05%(v/v)三氟乙酸及0.1%(v/v)三乙胺),流速0.8 mL/min,检测波长228nm。
在马尿酸浓度为5-50μg/mL时,马尿酸浓度与其峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9997),马尿酸的回收率为93.55%-101.50%,相对标准偏差(RSD)为2.95%。采用此法测得绿茶茶多酚 ...


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