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土霉素片微生物检查方法的验证_药学专业毕业论文范文

发布时间:2014-05-14 来源:人大经济论坛
土霉素片微生物检查方法的验证_药学专业毕业论文范文                  【论文关键词】土霉素片;微生物限度检查法     【论文摘要】目的:建立土霉素片的微生物限度检查方法。 方法:采用薄膜过滤法对土霉素片处理后,分别进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。结果:金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的回收率均大于70%。结论:土霉素片采用薄膜过滤法检查微生物限度方法成立。     Terramycin piece microorganism inspection method confirmation Wang Yanning Guo Lingbo 【Abstract】Objective:Establishment terramycin piece microorganism limit inspection method. Method: Uses the thin film to filter the law after terramycin piece processing, separately carries on the bacterium, the mold and the saccharomycetes counts the method confirmation.Result:The golden yellow staphylococcus and the white rosary fungus returns-ratio is bigger than 70%. Conclusion: The terramycin piece uses the thin film to filter the law inspection microorganism limit method to be tenable. 【Key words】Terramycin piece; Microorganism limit inspection method 土霉素是四环素类抗生素,能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位结合,抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成,对细菌有广谱抑菌作用。因此其微生物限度检查不能用平皿法,而应采用薄膜过滤法消除其抑菌作用后再检查。 1 1.1 仪器:HWS-250型恒温恒湿箱(天津苏瑞科技开发有限公司),集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司),薄膜(孔径0.22um),康氏振荡器。 1.2 试剂:玫瑰红钠琼脂培养基,营养琼脂培养基,胆盐乳糖增菌培养基,MUG培养基,甘露醇氯化钠琼脂培养基等,均由中国品生物制品检定所提供。 1.3 菌种:阳性对照菌:金黄色葡萄球菌(验证细菌)、白色念珠菌(验证酵母菌、霉菌);阴性对照:金黄色葡萄球菌(验证大肠埃希菌)。所用菌种均由中国药品生物制品检定所提供;稀释剂及冲洗剂为pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。 1.4 样品:土霉素片[0.25g(25万单位)],厂家为河南华利药业有限责任公司,批号为07070601。 2 方法与结果 2.1 细菌、霉菌、酵母菌检查方法验证。 2.1.1 细菌检测方法验证。 2.1.1.1 试验组:取供试品10g,加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,于康氏振荡器上振摇10分钟,使片分散,500转、分离心后,分离上清液作为供试液。取上述供试液10ml,加入100ml稀释剂中,薄膜过滤,用冲洗液冲洗2次,每次100ml,第3次冲洗液中加入金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml,薄膜过滤,取出滤膜,面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。 2.1.1.2 菌液组:取金黄色葡萄球菌菌悬液0.5ml,直接接种于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。 2.1.1.3 供试品对照组:取上述供试液10ml,加入100ml稀释剂中,薄膜过滤,用冲洗液冲洗3次,每次100ml,取出滤膜,面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。 2.1.1.4 稀释剂对照组:取稀释液10ml,薄膜过滤,用冲洗液冲洗2次,每次100ml,第3次冲洗液中加入0.5ml金黄色葡萄球菌菌悬液,薄膜过滤,取出滤膜,菌面朝上贴于营养琼脂平皿上,35℃培养48小时,计数。 2.1.1.5 上述试验连续做三次,结果如下: 金黄色葡萄球菌计数后平均值: 稀释剂对照组菌数:第一次47个,第二次53个,第三次49个; 菌液组菌数:第一次58个,第二次64个,第三次60个; 试验组菌数:第一次45个,第二次54个,第三次46个; 供试品对照组菌数:第一次0个,第二次0个,第三次0个。 2.1.1.6 计算金黄色葡萄球菌回收率。 2.1.1.6.1 稀释剂对照组的回收率:(稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数)×100% 第一次:47/58×100%=81.0%
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