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论乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血脑组织氧自由基的影响_药学专业毕业论文
论文关键词:乌龙丹;氧自由基;大鼠局灶性脑缺血模型
论文摘要:
缺血性脑病是常见病、多发病,现代表明,氧自由基的毒性作用是引发脑缺血后神经细胞损害病理级联反应的重要环节,本实验通过检测乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血模型中脑组织氧自由基的变化情况,以探讨治疗缺血性脑病临床经验方乌龙丹是否可通过影响缺血脑组织中氧自由基的含量,从而起到神经元保护作用。
1 实验
乌龙丹物,由南方医科大学南方医院房提供,加工为流浸膏(2.5g/mL);MDA、SOD试剂盒(南京建成生物制品研究所),蛋白定量试剂盒(伊利康生物工程研究所),分析纯冰乙酸,20%磷钨酸溶液,0.8%硫代巴比妥酸(TBA)溶液(南方医科大学试剂中心);754型紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂),高速低温离心机(美国贝克曼公司)。
2 实验分组
Wistar大鼠36只,清洁级,雌雄各半,体重(250±20)g,批号2004A068,由南方医科大学动物中心提供。随机分成正常组、假手术组、模型组,乌龙丹低剂量组、中剂量组、高剂量组。给药组术前灌服乌龙丹流浸膏,给药7天,低、中、高给量分别为1、2、4mL,正常组、假手术组和模型组灌服2mL生理盐水。于末次给药后2h造模,术后连续给药,24h后处死。
3 实验方法
3.1 模型制备 假手术组只做开颅术,不结扎血管;模型组与实验组开颅制作大鼠局灶性脑缺血模型,操作过程如下:结扎右侧颈总动脉,夹闭左侧颈总动脉,阻断右侧大脑中动脉。
3.2 样品制备 造模后24h立即处死动物,准确称取右侧大脑,在冰浴上分离出缺血区脑组织,以冰盐水冲洗后除去残血,吸干后称重,按1:9(W:V)比例加入冰生理盐水,制成10%脑匀浆液,离心1000×g,10min(4℃),取上清液检测。
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