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浅谈动态观察柴胡皂苷a对实验性癫痫小鼠痫性发作的影响_药学毕业论文

发布时间:2014-07-01 来源:人大经济论坛
摘要:目的 研究柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)对戊四氮(PTZ)诱导的小鼠痫性发作的影响,了解其药效特点。 方法 采用PTZ诱导小鼠急性痫性发作来制作癫痫模型,通过记录不同时间点小鼠痫性发作潜伏期和强直性惊厥率的变化,研究SSa抗小鼠PTZ致痫作用的动态特征。结果 SSa 腹腔注射30、60、90 min组能显着延长阵发性痉挛潜伏期(P0.05),其中SSa 90 min组作用最为显着(P001)。在60、90、120 min组中,SSa 腹腔注射也能明显延长强直性惊厥潜伏期(P0.05),其中尤以90 min组作用显着(P001); SSa 90 min组对过渡时间延长作用显着(P0.05);SSa 30 min、60 min组能减少PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数(P005),且以SSa 60 min组作用最为显着。结论 SSa具有对抗小鼠PTZ致痫作用;腹腔注射SSa对PTZ诱导小鼠的痫性发作在120 min内以60 min、90 min药效作用较强。 关键词:实验性癫痫;柴胡皂苷 a; PTZ;小鼠 Abstract: Objective To study the dynamic variations of the effect of saikosaponin a (SSa) on epileptic mice induced by pentylenetetrazol(PTZ),and to understand the effect characteristics of SSa. Method With the epileptic mice induced by PTZ as animal model. In the different time point,the tentative seizure incubation period and the case of tetanic convulsion were recorded to study the characteristics of the antiepileptic effect of SSa on mouse induced by PTZ. Results In the group of 30min,60 min and 90 min,the incubation period of clonic cramp was significantly prolonged by SSa (P0.05),and in the group of 90 min,the effect was remarkable (P0.01). Also,intraperitoneal injection of SSa could prolong the incubation period of tetanic convulsion in the group of 60 min,90 min and 120 min (P0.05).The effect was especially evident in the group of 90 min (P0.01). In the group of 90 min,the transition time was remarkably prolonged by SSa (P0.05). In the group of SSa 30 min and SSa 60 min,SSa could reduce the tetanic convulsion of epileptic mice introduced by PTZ (P0.05),and the effect is more significant in the group of 60min than that in the group of 30min. In the group of 30 min and 60 min,SSa could protect the epileptic mice introduced by PTZ from tetanic convulsion more significantly than those in the group of 90 min and 120 min.Conclusions SSa can inhibit the epileptic mice induced by PTZ,SSa can protect the mouse from tetanic convulsion,and in 2 hours,the effect was more remarkable at 60th min,90th min than others. Key words: epilepsy; Saikosaponin a; PTZ; mice 柴胡皂苷(saikosaponin)为中药柴胡的主要成分之一,其单体成分之一的柴胡皂苷a(SSa)有降血脂、抗渗出、抗肉芽肿和保护肝细胞等作用[1],对于慢性肾病的治疗也有较好疗效[2,3],但目前尚没有SSa抗癫痫作用的报道。不过已有不少证据表明柴胡及柴胡总皂苷具有镇静和抗实验性癫痫的作用[4,5]。在柴胡皂苷单体各成分中,为明确何种皂苷单体具有抗癫痫作用,笔者研究了SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作的影响,并探讨SSa对痫性发作影响的不同时间的动态变化,以期了解SSa抗癫痫药效作用的时间特点。 1 材 料 1.1 动物 健康昆明种小鼠180只,雌雄各半,体质量(20±2)g,由南方医科大学动物实验中心提供,合格证号为2004A063。 1.2 主要试剂 柴胡皂苷a购自上海医药工业研究所,批号050106;丙戊酸钠(VPA)注射剂(德巴金)由杭州赛诺菲圣德拉保民生制药有限公司生产,批号0402049。 戊四氮由美国Sigma公司生产,批号064k0686。 2 实验方法 1 实验动物分组 将180只昆明小鼠随机分为9 组,每组20只,雌雄各半。A组:生理盐水组(生理盐水+ PTZ致痫),作为以下各组的对照组;B、C、D、E组分别为经SSa预处理30、60、90、120 min组(SSa 30 min、SSa 60 min、SSa 90 min、SSa 120 min + PTZ致痫);F、G、H、I组分别为经VPA预处理30、60、90、120 min组(VPA 30 min、VPA60 min、VPA90 min、VPA120 min + PTZ致痫)。 2 模型制备及给药方法 A组小鼠在腹腔内注射生理盐水(10 mL/kg)后30 min时腹腔注射PTZ(85 mg/kg)致痫;B、C、D、E组小鼠分别在腹腔注射SSa(7.24 mg/kg)后30、60、90、120 min时腹腔注射上述剂量的PTZ致痫;F、G、H、I组小鼠分别在腹腔注射VPA (200 mg/kg)后30、60、90、120 min时腹腔注射上述剂量的PTZ致痫。 3 观察指标 小鼠痫性发作分级采用Racine标准[4]。0级:无发作反应;1级:节律性口角、耳或面部肌肉抽动阵挛;2级:点头并伴随更严重的面部肌肉抽动阵挛;3级: 出现前肢阵挛但不伴随直立;4级:前肢阵挛伴随直立;5级:全身强直阵挛发作而跌倒。腹腔注射PTZ后立即观察小鼠的行为动作,连续10 min,记录小鼠痫性发作潜伏期,包括阵发性痉挛潜伏期(即从注射PTZ开始至相当于1~3级发作的时间)、强直性惊厥潜伏期(即从注射PTZ开始至相当于5级发作的时间),计算由阵发性痉挛向强直性惊厥发作的过渡时间;并记录发生强直性惊厥的例数,计算其发作率。 4 统计学处理 应用SPSS10.0软件,多样本均数的比较采用方差分析,计数资料及率的比较用卡方检验,以P005为差异有显着性。 3 结 果 1 SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作潜伏期的动态影响 将对应时间点SSa预处理、VPA预处理组与生理盐水组比较,B、 C、D、F、G、H各组阵发性痉挛潜伏期明显延长,与A组比较差异有显着性(P0.05),其中尤以D、F、G组差异显着(P0.01);C、D、E、 F、H组强直性惊厥潜伏期同样延长,与A组比较差异有显着性(P0.05),其中尤以D、F组差异显着(P001);在过渡时间的比较中,D、F组与A组比较差异均有显着性(P0.05),其中尤以F组差异显着(P0.01)。将对应时间点的SSa组与VPA组比较,30 min时 SSa组对各潜伏期的延长作用不如VPA组(P001),其余各时间点比较差异无显着性。见表1。以上结果提示,SSa不仅能明显延长阵发性痉挛潜伏期,而且能够显着延长强直性惊厥潜伏期及其过渡时间,其作用在60 min、90 min时强于30 min、120 min时,而VPA的作用以30 min和60 min强于90 min与120 min,可见SSa达到最佳作用的时间比VPA延后。表1 SSa对PTZ致痫小鼠痫性发作潜伏期的动态影响(略) 2 SSa对PTZ致痫小鼠强直性惊厥发作例数的动态影响
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